Nuevos protocolos mejoran la detección de microRNA para el diagnóstico

De acuerdo con una investigación publicada hoy en The Journal of Molecular DiagnosticsLos microARN (miARN) que coordinan los procesos, como el desarrollo, el envejecimiento y la fertilización, son prometedores como biomarcadores de la enfermedad. Los microARN se pueden recolectar rutinariamente de fluidos como orina, sangre y saliva. En este estudio, los investigadores presentan métodos claros para recolectar y examinar miARN, mejorando considerablemente su precisión diagnóstica.
El investigador principal Dominik M. Duelli, PhD, Departamento de Farmacología Celular y Molecular de la Facultad de Medicina de Chicago en la Universidad Rosalind Franklin de Medicina y Ciencia, explica:

"Nuestro estudio demuestra que las diferencias inherentes en las muestras biológicas y los métodos utilizados para recolectarlas y analizarlas pueden afectar drásticamente la detección y cuantificación de los microARN. Desarrollamos medidas para superar las actividades interferentes y mejorar la sensibilidad de la detección de miARN hasta 30 veces. "

Los científicos dicen que hay más de mil miRNAs en el cuerpo humano. La desregulación de miRNAs específicos está relacionada con la enfermedad. La medición de la cantidad de miRNAs en los fluidos corporales puede ayudar a diagnosticar enfermedades, afecciones o desarrollos naturales, como el embarazo.
El Dr. Duelli y su equipo midieron la cuantificación de dos miRNAs: MiR-223, implicado en algunas enfermedades malignas, embarazo y otras afecciones; y miR-16, que actúa como un supresor tumoral y se pierde o desregula en algunos cánceres, incluido el cáncer de mama.
La investigadora Sarah Linnstaedt, PhD, de la Universidad de Duke, dijo:

"Un desafío fundamental para hacer que los diagnósticos de microARN estén ampliamente disponibles ha sido la incapacidad de aislar suficiente material de alta calidad para analizar. Nuestro documento describe formas de recolectar muestras de plasma sanguíneo, acercándonos un paso más al objetivo de hacer diagnósticos de enfermedades con [miARN] realidad."

Los investigadores informan que la cuantificación se ve afectada por la elección de los tubos de extracción de sangre. Descubrieron que los mejores resultados los proporcionaban los tubos con tapa gris que contenían el fluoruro de sodio anticoagulante y el oxalato de potasio (NaF / KOx), mientras que los tubos verdes tradicionales interferían casi por completo con la detección de miARN.
Aunque miR-16 es aproximadamente 500 veces más abundante en plasma sanguíneo en comparación con miR-223, los resultados de ambos fueron comparables, lo que sugiere que las diferencias de detección resultantes de la elección de la técnica de recolección se aplican a otros miRNA. Además, se produjeron resultados más variables al recolectar miR-223 en el suero, lo que indica que para algunos miRNAs, se favorece el examen de la sangre en forma de plasma.

Finalmente, los investigadores vieron que las diferencias en la estructura del plasma entre los donantes individuales producían diferentes mediciones de miARN.
El Dr. Duelli, explica:

"Estos resultados aumentan la posibilidad de que factores como la dieta, el ejercicio, los ritmos circadianos y las estaciones, que alteran la química de la sangre, puedan afectar la detección y cuantificación de los miARN.
Las implicaciones de este trabajo son que sin considerar la variable que hemos identificado, la cuantificación de miARN de muestras humanas puede no ser confiable para el propósito del desarrollo de biomarcadores. Proporcionamos enfoques que permiten una cuantificación fiel de la abundancia de miARN en el fluido corporal ".

Escrito por Grace Rattue